性交网站免费_老妇高潮潮喷到猛进猛_亚洲成av人无码_国产日韩无码一二区精品_国产熟女大屁股_日韩性爱四区_无码插_国产女人Av国产_九九综合在线_欧美色图激情小说_欧美熟妇另类久久久久久不卡_强奸乱伦中文字幕第一页_国产精品久久丝袜人妻_亚洲视频高清无码_国产情侣AV在线

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 關于紫外交聯儀的使用步驟盡在本篇

關于紫外交聯儀的使用步驟盡在本篇

更新時間:2023-01-09   點擊次數:1838次
  紫外交聯儀的主要用途為在膜上交聯核酸,其是一種254mm紫外輻射系統,其有很多用途,UV滅菌消除PCR污染、嘧啶二聚體產生的部分限制性內切酶消化、RecA突變篩選以及瓊脂糖凝膠中DNA的切割等亦是其用途。其的應用價值也體現在聚合物紫外處理和紫外滅菌等方面。
 
  以下為紫外交聯實驗的步驟,一起來看看吧
 
  1、混合10μL含有高親和性蛋白結合位點的目的序列的單鏈M13載體和等摩爾的17bpM13通用引物,使用1×限制性內切核酸酶緩沖液調節終體積到100μL。在90攝氏度下加熱5分鐘。在室溫下冷卻、
 
  2、在雜交混合物中加入Klenow酶5μL、水7μL、10×限制性內切核酸酶緩沖液7.5μL、0.1mol/L二硫蘇糖醇1.75μL、50×dNTP/BrdU溶液3.5μL、[α32P]dCTP50μ等反應物,在16攝氏度下溫浴90分鐘。
 
  3、在68攝氏度下加熱10分鐘,將Klenow酶滅活。
 
  4、使用40U限制性內切核酸酶在合適條件下消化,使得20600bp的DNA片段產生。
 
  5、將乙酸銨添加到0.3mol/L,DNA使用2倍體積的1**%乙醇進行沉淀,在TE緩沖液中重懸。
 
  6、電泳在含有0.5μg/mL溴化乙錠的瓊脂糖凝膠上進行。所要的DNA片段使用DEAE膜進行分離。
 
  7、BrdU取代的DNA片段的特異活性使用閃爍計數器進行檢測,DNA的濃度的估計采用溴化乙錠點跡定量法。能夠采用遷移率變動DNA結合分析法來檢測探針的完整性和功能。
 
  8、將下列結合反應建立于1.5mL圓底小瓶中:將10-20μgDNA載體、經緩沖的含有結合蛋白的提取液以及105cpm均衡標記的探針混合,調節總體積到50μL。瓶口使用塑料薄膜封住,固定再采用Parafilm膜加封。
 
  9、在試管架上放上小瓶,于正上方5厘米處使用倒置的紫外透射燈照射1個小時。
 
  10、將1U微球菌核酸酶、DNA酶I4μg、0.5mol/LCaCl21μL等反應物加入到各結合反應管中,在37攝氏度下消化半個小時。
 
  11、在反應混合物中加入等體積的2×SDS樣品緩沖液,在100攝氏度中煮沸5分鐘。
 
  12、樣品的電泳在適當濃度的不連續SDS-聚丙烯酰胺凝膠上進行。
 
  13、完成電泳之后,將凝膠前沿的染料切去。
 
  14、干膠,使用增感屏放射自顯影13日,來對交聯的蛋白質進行觀測。
上海路陽儀器有限公司
上海路陽儀器有限公司
地址:上海市松江區新橋鎮泗磚南路255弄120號
主營產品:黑光燈,探傷燈,紫外交聯儀,實驗室高強度紫外線燈,熒光蛋白激發光源,GFP觀察燈,篩選轉基因熒光蛋白GFP激發光源,紫外線探傷燈,LED磁粉探傷燈,熒光檢漏燈,熒光檢漏劑,檢漏手電筒,脫脂檢測燈,熒光蛋白觀察燈

© 2025 版權所有:上海路陽儀器有限公司  備案號:滬ICP備10002130號-7  總訪問量:293970  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

亚洲一区资源你懂的| AV男人的天堂網| 久久综合激情五月| 欧美国产免费A视频| 香蕉日b| 欧美人妻人人持久| 玖草资源大香蕉人妻| 捅女人30分钟| 久久久久噜噜噜亚洲熟女综合| 找AV导航地址| 五月婷丁香AV啪啪啪| 亚欧洲黄色影视精品| 亭亭五月天中文字幕| 色五月婷婷开心在线观看| 欧美日本性爱AA片| 亚洲国产无码内射| 午夜啊啊网站| 久久性愛网| 亚洲精品A片在线观看视频| 一区二区三区无码漫画| 淫爱AV中文字幕| 白色白色免费婷婷| 17c久久久久| 大香蕉人妻6| 亚洲乱伦色图| 日韩五码第一页| 五月天福利激情| wwwwwwA片| 熟女大屁股| 清操人妻av| 另类小说色吧91| 韩国中文字幕HD久久| 91热电影天堂| 影音先锋女人乳汁AV| 成人肉肉在线| 一起草黄片观看| www,97色色色| 香蕉www5五月天| 毛片A片网站| 久久忆大香蕉| 青青草东路热sv| 日本五月天大香蕉| av免费我网址| 精品69xxx国产| 免费国产一区在线| 伊人在线A片| 五月丁香色婷婷肏屄| 丰满少妇性久久久| 国内淫乱精品| 免费无码大黄网站| 免费观看女同网址| 97se色色色| 婷婷五月入口| 人八肏天天日| 人人搞人人妻人人操| 91夜夜嗨国产| 二aV影院| 亚洲 粉 香蕉 色| 亚洲精品一区久久久久久| 17c色操精品| 在线观看嗯嗯| 成人影视伊人99| 国产精品一区二区密桃| 亚洲av1 区| 天堂a阿姨| 伊人桃色| 91人男女| 91人妻酒店| 伊人色色影院| 五月天情色图片网站| 哎操人妻av| 欧美色图片在线视频| 91黄色性爱网站| 艳妇乳肉豪妇荡乳久久久| 先锋影音日韩AV女优| 日韩无码vs亚洲无码| 四虎免看黄| 国产黑丝后入| 五月天婷婷色情网| 亚洲综合成人网站| 欧美全黄黄色录像播放| 亚洲1级a片| 奇米大香蕉五月| 加勒比少妇伦理| 一起草con在线视频| 曰夜撸AV在线观看| 中文字幕无码av在线播放| 天天好日网369|